ÖZET

Amaç:

Bu çalışmanın amacı, Channa punktata’nın (Bloch, 1793) visseral organlarından izole edilen Eustrongylides sp.’nin larva formunun morfolojik ve moleküler yöntemlerle belirlenmesidir.

Yöntemler:

Balıklar, nematodların toplanması için Nadia ve Kuzey 24 Paraganas’taki balık çiftliklerinden toplandı. İç organlar diseke edildi ve %0,67 normal salin içinde tutuldu. Işık mikroskobu çalışması için karın bölgelerinden ve iç organlardan toplanan nematodlar, %70 etanol içinde sabitlendi. Nematodlar laktofenol içerisine yerleştirilerek morfolojik özellikleri incelendi. Numuneler daha sonra %5 gliserin içeren %70 etanol içinde muhafaza edildi. Taramalı elektron mikroskobu için işlenen numuneler %2,5 glutaraldehit içinde ve daha sonar %1 osmiyum tetraoksit içinde sabitlendi. Standart metodoloji kullanılarak uygun tanımlama yapıldı. 18S rRNA, ITS1, 5.8S rRNA, ITS2 ve 28S rRNA gen fragmanı için polimeraz zincir reaksiyon amplifikasyonu ve dizileme kullanılarak moleküler çalışmalar ve filogenetik analiz yapıldı.

Bulgular:

Nematodların morfolojik özellikleri ışık ve taramalı elektron mikroskobu yardımıyla yeniden tanımlanmıştır. Sefalik papillaların boyutları ve şekli, somatik papillaların yokluğu, kaudal papillaların varlığı gibi daha önce tanımlanmayan ek özellikler ilk kez tanımlanmıştır. Ayrıca, ITS bölgeleriyle yapılan moleküler çalışmalar, nematodun tanımını daha da doğrulamıştır.

Sonuç:

Moleküler tekniklerle birlikte morfotaksonominin kullanılması, yenilebilir balıkları enfekte eden Eustrongylides sp.’nin doğru tanımlanmasına yardımcı olacaktır. Nematod üzerinde yapılan çalışmalar, parazitin ara ve paratenik konaklarının araştırılmasına yardımcı olacaktır. Bu bağlamdaki veriler, yenilebilir balıkları istila eden parazitlerle ilgili olarak balık veritabanına önemli ölçüde katkıda bulunacaktır.

References

Paperna l. Parasites, infections and diseases of fishes in Africa: An update. RFAO/CIFA Technical Paper No 31; 1996.

Roberts lS, Janovy J. Gerald D Schmidt and Larry S. Roberts’ Foundation of Parasitology. McGraw-Hill International Editions. 6th Edition. Boston; 2000.

Dawes B. The Trematoda with special reference to British and other European forms. Cambridge University Press, Cambridge: England; 1946.p644.

Hoffman GL, Bauer ON. Fish parasitology in water reservoirs: A review. In G.E. Hall (ed) Reservoir fisheries and limnology. American Fisheries Society 1971; 56: 78-89.

Karve JN. Some parasitic nematodes of frogs and toads. Ann Trop Med PH 1930; 24: 481-91.

Agarwal V. Studies on some nematode parasites of freshwater fishes from Lucknow. Ann Parasitol Hum Comp 1966; 41: 217-37.

Soota TD. Studies on nematode parasites of Indian vertebrates I. Fishes Rec Zool Surv India Occ Paper 1983; 352.

Yamaguti S. The Nematodes of vertebrates. In: Systema Helminthum. Volume III. John Wiley and Sons: New York; 1961.

Moravec F. Parasitic nematodes of freshwater fishes of Europe. Kluwer Academic Publishers, Dordrecht/Boston: London; 1994.

Anderson RC. Nematode parasites of vertebrates their development and transmission. 2nd Edition. CABI Publising; 2000.

Moravec F, Nie P, Wang G. Some nematodes of fishes from central China, with the redescription of Procamallanus (Spirocamallanus) fulvidraconis (Camallanidae). Folia Parasitol (Praha) 2003; 50: 220-30.

Xiong F, Wang GT, Wu S, Nie P. Development of Eustrongylides ignotus (Nematoda: Dioctophmida) in domestic ducks (Anas Platyrhynchos domestica L. J Parasitol 2009; 95: 1035-9.

Novakov N, Bjelic-Cabrilo O, Cirkovic M, Jubojevic D, Lujic J, Davidov I, et als. Eustrongylidosis of European catfish (Siluris glanis). Bulgarian Journal of Agricultural Science 2013; 19: 72-6.

Llchtenfels JR, Pilitt PA. Eustrongylides sp. (Nematoda: Dioctophymatoidea): Differentiation of third and fourth-Stage larvae from killifish, Fundulm sp, collected in Chesapeake Bay Area, U.S.A. Proc Helminthol Soc Wash 1986; 53: 144-8.

Mazzone A, Caffara M, Gustinelli A, Agnetti F, Sgariglia E, Lo Vaglio G, et al. Morphological and molecular characterization of larval and adult stages of Eustrongylides excisus (Nematoda: Dioctophymatoidea) with histopathological observations. J Parasitol 2019; 105: 882-9.

Gupta N. Light and scanning electron microscopic studies on eustrongylides exciscus larvae (Nematoda: Dioctophmida) from Channa punctatus Bloch from India. Pak J Zool 2019; 51: 159-66.

Crites. Clear Technical Report No. 258, Ohio State University, Center for Lake Erie Area Research, Columbus: Ohio; 1982.p.83.

Čabrilo OB, Novakov N, Ćirković M, Kostić D, Popović E, Aleksić N, et al. The first determination of Eustrongylides excisus Jägerskiöld, 1909- larvae (Nematoda: Dioctophymatidae) in the pike-perch Sander lucioperca in Vojvodina (Serbia). Helminthologia 2013; 50: 291-4.

Measures LN. Revision of the genus Eustrongylides Jägerskiöld, 1909 (Nematoda: Dioctophymatoidea) of piscivorous birds. Can J Zool 1988; 66: 885-95.

Measures LN. The development of Eustrongylides tubifex (Nematoda: Dioctophymatoidea) in oligochaetes. J Parasitol 1988b; 74: 294-304.

McManus DP, Bowles J. Molecular genetic approaches to parasite identification: their value in diagnostic parasitology and systematics. Int J Parasitol 1996; 26: 687-704.

Xiong F, Li WX, Wu SG, Zou H, Wang GT. Molecular phylogeny and host specificity of the larval Eustrongylides (Nematoda: Diotophmidae) from freshwater fish in China. J Parasitol 2013; 99: 137-44.

Channa punctata Bloch’tan Larva Eustrongylides (Nematoda: Dioctophymatoidea) sp.’nin Morfolojik ve Moleküler Tekniklerle Tanımlanması, 1793

ÖZET

References